针灸推拿 | 针刺通过调控Nrf2、GPX4 mRNA表达抑制铁死亡减轻脑缺血再灌注损伤
针灸推拿 | 针刺通过调控Nrf2、GPX4 mRNA表达抑制铁死亡减轻脑缺血再灌注损伤
[摘要] 目的 探讨针刺干预调控核因子 E2 相关因子 2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4) mRNA 表达对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经细胞铁死亡的影响,探究针刺治疗 CIRI 的可能作用机制。方法 采用随机数字表法将 60 只雄性 SD 大鼠分为假手术组(20 只)、造模组(40 只)。造模组通过构建大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,模拟缺血再灌注损伤病理过程,造模成功后再随机分为模型组与针刺组,每组 20 只。针刺组捆绑并针刺大椎、百会、水沟穴,每次留针 30 min;假手术组与模型组只捆绑不针刺。以上各组每 12 h 干预 1 次,共干预 7 次。干预前后,采用改良 Garcia 评分对大鼠的神经功能受损状况进行评估;干预后,采用 TTC 染色法对脑组织梗死区域的体积占比进行测定,采用 RT-qPCR 法检测缺血半暗带区脑组织 Nrf2 与 GPX4 mRNA 表达水平,采用比色法、ELISA 法检测铁离子( Fe2+ )、活性氧(ROS)含量变化,采用 TBA 法、微板法检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量变化。结果 干预后,与假手术组相比,模型组神经功能评分显著降低(P<0.01),脑梗死体积比显著增大(P<0.01),Nrf2 mRNA 表达显著上调、GPX4 mRNA 表达显著下调(P<0.01), Fe2+ 、ROS、MDA 含量显著升高(P<0.01),GSH 含量显著降低(P<0.01)。干预后,与模型组相比,针刺组神经功能评分显著升高(P<0.01),脑梗死体积比显著缩小(P<0.01),Nrf2、GPX4 mRNA 表达显著上调(P<0.01), Fe2+ 、ROS、MDA 含量下降(P<0.05,P<0.01),GSH 含量升高(P<0.05)。结论 针刺可通过上调 Nrf2 mRNA 表达,促进其下游靶基因 GPX4 mRNA 表达,改善 CIRI 大鼠神经功能缺损,缩小脑梗死体积,减少铁过载和 ROS 生成,抑制脂质过氧化,从而发挥脑保护作用。